Nitroblautetrazolium ist eine chemische Verbindung, die aus zwei Tetrazolgruppen besteht . Es wird in der Immunologie zum sensitiven Nachweis von alkalischer Phosphatase (mit BCIP ) eingesetzt. NBT dient als Oxidationsmittel und BCIP als Substrat der alkalischen Phosphatase (und ergibt zudem einen dunkelblauen Farbstoff).
Klinische Bedeutung
In der Immunhistochemie wird die alkalische Phosphatase häufig als Marker verwendet, konjugiert an einen Antikörper . Das Farbprodukt der NBT/BCIP-Reaktion zeigt an, wo der Antikörper gebunden ist, oder kann in der Immunfluoreszenz eingesetzt werden . [ 1 ]
Die NBT/BCIP-Reaktion wird auch für kolorimetrische/ spektrophotometrische Aktivitätsbestimmungen von Oxidoreduktasen verwendet . Eine Anwendung ist die Verwendung als Aktivitätsfarbstoff in der Gelelektrophorese , beispielsweise bei den Komplexen der mitochondrialen Elektronentransportkette . [ 2 ]
Nitroblautetrazolium wird in einem diagnostischen Test eingesetzt [ 3 ] , insbesondere bei chronischer Granulomatose und anderen Erkrankungen der Phagozytenfunktion. Bei einem Defekt der NADPH-Oxidase kann der Phagozyt nicht die für die Abtötung von Bakterien notwendigen reaktiven Sauerstoffspezies (ROS) oder Radikale bilden. Dadurch können sich Bakterien im Phagozyten vermehren. Je höher der Blauwert, desto besser ist die Zelle in der Lage, ROS zu produzieren. [ 4 ]
Referenzen
- ^ Trinh le A, McCutchen MD, Bonner-Fraser M, Fraser SE, Bumm LA, McCauley DW (Juni 2007). „Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung mit dem konventionellen chromogenen Farbstoff NBT/BCIP“ . BioTechniques . 42 (6): 756–9 . doi : 10.2144/000112476 . PMID 17612300 .
- ^ Nisimoto Y, Wilson E, Heyl BL, Lambeth JD (5. Januar 1986). „NADH-Dehydrogenase aus Rinderneutrophilenmembranen. Reinigung und Eigenschaften“ . J. Biol. Chem . 261 (1): 285–90 . doi : 10.1016/S0021-9258(17)42467-7 . PMID 3941077 .
- ^ Freeman, R; King, B (Oktober 1972). „Technik zur Durchführung des Nitroblautetrazolium-(NBT)-Tests“ . Journal of Clinical Pathology . 25 (10): 912–914 . doi : 10.1136/jcp.25.10.912 . PMC 477548. PMID 4119008 .
- ^ Nathan DG, Baehner RL, Weaver DK (Oktober 1969). „Fehlen der Nitroblautetrazolium-Reduktion in den phagozytischen Vakuolen von Leukozyten bei chronischer Granulomatose“ . J. Clin. Invest . 48 (10): 1895–904 . doi : 10.1172/JCI106156 . PMC 322426. PMID 5387730 .
