PAS-Färbung (Periodische Säure-Schiff-Reaktion)

Die Perjodsäure-Schiff-Färbung ( PAS ) dient dem Nachweis von Polysacchariden ( wie Glykogen ) und Mukosubstanzen (wie Glykoproteinen , Glykolipiden und Muzinen) in Geweben. Die Reaktion mit Perjodsäure oxidiert benachbarte Diole in diesen Zuckern . Dabei wird üblicherweise die Bindung zwischen zwei benachbarten Kohlenstoffatomen gespalten, die nicht an der glykosidischen Bindung oder dem Ringschluss der Monosaccharideinheiten der langen Polysaccharide beteiligt sind. An den beiden freien Enden jedes gespaltenen Monosaccharidrings entstehen Aldehydgruppen . Die Oxidationsbedingungen müssen sorgfältig kontrolliert werden, um eine weitere Oxidation der Aldehyde zu verhindern. Diese reagieren dann mit dem Schiffschen Reagenz und ergeben eine purpur-magenta Färbung. Häufig wird ein geeigneter basischer Farbstoff als Gegenfärbung verwendet .

• Die PAS-Diastase-Färbung (PAS-D) ist eine PAS-Färbung, die in Kombination mit Diastase , einem Enzym , das Glykogen abbaut, verwendet wird.

• Bei der Alcianblau/Periodische Säure–Schiff-Reaktion (AB/PAS oder AB-PAS) wird Alcianblau vor dem PAS-Schritt verwendet.

Die PAS-Färbung wird hauptsächlich zur Anfärbung von Strukturen verwendet, die einen hohen Anteil an Kohlenhydratmakromolekülen ( Glykogen , Glykoprotein , Proteoglykane ) enthalten und typischerweise z. B. in Bindegewebe , Schleim , der Glykokalyx und Basallamina vorkommen .

Die PAS-Färbung kann zur Unterstützung der Diagnose verschiedener Erkrankungen eingesetzt werden:

• Glykogenspeicherkrankheit (im Gegensatz zu anderen Speicherkrankheiten).
• Adenokarzinome , die häufig neutrale Muzine sezernieren.
• Morbus Paget der Brust . ^{[ 1 ]}
• Alveoläres Weichteilsarkom . ^{[ 2 ]}
• Anfärbung von Makrophagen bei Morbus Whipple . ^{[ 3 ]}
• Es kann zur Diagnose eines α1-Antitrypsinmangels verwendet werden , wenn periportale Leberhepatozyten positiv angefärbt sind.
• Bei Mycosis fungoides und Sézary-Syndrom finden sich in der Epidermis Ansammlungen von PAS-positiven Lymphozyten , die als Pautrier-Mikroabszesse bezeichnet werden.
• Ewing-Sarkom
• Erythroleukämie , eine Leukämie unreifer roter Blutkörperchen. Diese Zellen färben sich leuchtend fuchsiafarben.
• Pulmonale alveoläre Proteinose .
• Bei einer Pilzinfektion färben sich die Zellwände der Pilze magenta; diese Methode funktioniert jedoch nur bei lebenden Pilzen. Im Gegensatz dazu färbt die Grocott-Methenamin-Silber-Färbung (GMS) sowohl lebende als auch tote Pilzorganismen an.
• Es wird zur Identifizierung von Glykogen in Lungenbiopsieproben von Säuglingen mit pulmonaler interstitieller Glykogenose (PIG) ​​verwendet.
• Es kann verwendet werden, um hochvernetzte Lipideinschlüsse bei Ceroidlipofuszinose (NCL) hervorzuheben.

Das Vorhandensein von Glykogen in einem Gewebeschnitt lässt sich bestätigen, indem man das Glykogen mit Diastase verdaut und anschließend einen diastasebehandelten PAS-Schnitt mit einem normalen PAS-Schnitt vergleicht. Der diastasenegative Präparat zeigt eine magentafarbene Färbung an den Stellen, an denen Glykogen im Gewebe vorhanden ist. Der diastasebehandelte Präparat hingegen weist an diesen Stellen keine positive PAS-Färbung auf.

Die PAS-Färbung wird auch zur Anfärbung von Zellulose verwendet . Ein Beispiel hierfür wäre die Suche nach implantierten medizinischen Geräten, die aus nichtoxidierter Zellulose bestehen.

Soll die PAS-Färbung an Gewebe durchgeführt werden, empfiehlt sich als Fixiermittel 10 %iges neutral gepuffertes Formalin oder Bouin-Lösung . Für Blutausstriche wird Methanol empfohlen . Glutaraldehyd ist nicht empfehlenswert, da freie Aldehydgruppen mit dem Schiffschen Reagenz reagieren und dadurch falsch-positive Ergebnisse verursachen können . ^{[ 4 ]}

• PAS-Reaktion